一、我國(guó)PRRSV的流?趨勢(shì)

1.非洲豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征（豬藍(lán)耳?。?、豬流?性瀉是危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)最主要的三?疫病。

2.豬藍(lán)耳病主要引起母豬流產(chǎn)和仔豬呼吸道疾病，同時(shí)伴有不同程度的繼發(fā)細(xì)菌感染。

3.歐洲型PRRSV分為4個(gè)亞型，其中Western Eouropean Subtype I具有全球流行性。

4.美洲型PRRSV分為9個(gè)lineages，其中L1分? PRRSV具有全球流?性，L1、L8分支對(duì)我國(guó)影響最大。

5.2016年以前是高致病性藍(lán)耳代表的L8分支，2016年以后是NADC30代表的L1分支。

6.L1A變異株（類(lèi) 30 + HP + 類(lèi) 34）的出現(xiàn)與流行。

二、PRRSV抗原檢測(cè)試劑盒研制及應(yīng)用

1.PRRSV 抗原檢測(cè)試劑盒研制難點(diǎn)

（1）中國(guó)的PRRSV亞型眾多，變異快，基因組差異?，很難找到絕對(duì)保守的位置。

（2）PRRSV毒株復(fù)雜多樣，重組復(fù)雜，多毒株混合感染現(xiàn)象普遍。

（3）同一類(lèi)型毒株，序列一致的情況下，基因組二級(jí)結(jié)構(gòu)可能存在較?差異。

（4）不同亞型探針序列，與發(fā)光/淬滅集團(tuán)的適配性存在差異。

2.PRRSV檢測(cè)試劑盒的選擇

3.PRRSV檢測(cè)采樣類(lèi)型

（1）建議死淘豬采扁桃體、頜淋、肺臟。

（2）發(fā)病?峰期可以采血或死淘豬采扁桃體、頜淋、肺臟。

（3）流產(chǎn)豬的血及胎?檢出?例低，建議送7-21天的同批次弱仔的扁桃體、頜淋、肺臟。

（4）日常檢測(cè)可以送口?液、臍帶血等，我們對(duì)日常監(jiān)測(cè)的建議是保留死淘豬的扁桃體、頜淋、肺臟集中送檢或隨時(shí)送檢。

4.PRRSV檢測(cè)試劑盒ct值差異及與病毒載量的關(guān)系分析

（1）同一份數(shù)據(jù)，曲線(xiàn)正常的ct值??與設(shè)置有關(guān)。

（2）同一款試劑盒更換酶（尤其是自研試劑盒）或者熒光定量PCR

儀對(duì)ct值及曲線(xiàn)的形態(tài)均會(huì)產(chǎn)?較?影響。

（3）對(duì)于同一款批次穩(wěn)定的試劑盒，其ct值的??與病毒載量有關(guān)

（縱向?較），不同試劑盒之間沒(méi)有可?性（橫向?較）。

5.PRRSV檢測(cè)試劑盒ct值與測(cè)序

（1）ct值，病毒載量?，就一定能測(cè)序嗎？

①不同試劑盒CT值沒(méi)有可?性，他家ct值35可以測(cè)出來(lái)，你家ct值30也未必測(cè)出。

②ct值小，但是無(wú)法測(cè)序，排除?為因素，可能存在以下三?原因：一是存在非特異性過(guò)高；二是測(cè)序引物與當(dāng)前毒株不匹配；三是普通PCR所用酶的敏感性不夠。

（2）我們研究的一款美洲型和歐洲型一步法熒光RT-PCR試劑盒ct值與測(cè)序的關(guān)系：ct≤30測(cè)序率接近100%；30<ct≤35測(cè)序率約40%；

35<ct≤38測(cè)序率不?10%（配套4+2+N測(cè)序引物）。

6.PRRSV測(cè)序解讀-毒株類(lèi)型判斷

（1）如果能夠獲得PRRSV的全基因組，對(duì)毒株類(lèi)型的判斷相對(duì)?較準(zhǔn)確。

（2）而多數(shù)情況下，我們只獲得了PRRSV的部分基因，如NSP2部基

因、ORF5、ORF7基因等。那如何更好的判斷豬場(chǎng)的毒株類(lèi)型呢？

①NSP2+ORF5/ORF7：?概率能夠反映這個(gè)毒株類(lèi)型。

②NSP2/ORF5/ORF7之一：只能是粗略判斷毒株類(lèi)型。

三、結(jié)論

1.我國(guó)的PRRS呈現(xiàn)美洲型和歐洲型雙基因型以及多個(gè)亞型共存的局面。我國(guó)的美洲型PRRSV 呈現(xiàn)“30+”、歐洲型PRRSV呈現(xiàn)基因組“差異?”、豬場(chǎng)內(nèi)PRRSV呈現(xiàn)多毒株“混合感染”的新特點(diǎn)。

2.PRRSV抗原檢測(cè)試劑盒研制難度?，不同試劑盒之間的差異?，選擇合適的試劑盒，并正確運(yùn)用，為豬場(chǎng)PRRSV的監(jiān)測(cè)及防控助力。

會(huì)議筆記由哈爾濱國(guó)生生物科技股份有限公司曹野記錄整理。